技術文章
TECHNICAL ARTICLES要完成一項漂亮的ELISA實驗,不光要做足實驗的準備,還要對其他各種輔助材料有所了解,這其中防腐劑的運用很重要,ELISA試劑盒中常用的防腐劑有:1.疊氮鈉是HRP的抑制劑,凡是和HRP接觸的試劑,一定不能用;2.硫柳汞在ELISA試劑中可普遍使用,但因其有毒,較少使用;3.市面許多試劑盒產品,用抗生素做防腐劑較多,如慶大。4.如果試劑僅在實驗室短期使用,其實并不需加防腐劑,常規試劑放4度冰箱,抗體、酶等加甘油分裝凍存即可。5.防污染可添加0.02%的疊氮鈉,或0.01%的硫...
ELISA試劑盒收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃備用,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。ELISA試劑盒樣本的處理方式:1、組織提取液、肺泡灌洗液等,采集后離心分離,800-1000rmpx5min,取上清,-20℃或4℃保存備用;2、胃液、唾液、尿液的采集方式一般現采現用,胃液、唾液一般采集時間是空腹采集,一般隔夜尿不采集;3、采集血清時,一般要加入總體積1%的抗凝劑,采集后先室...
咱們在運用ELISA試劑盒96孔板的試驗測定的時分,常發現有“邊緣效應",也就是外周孔顯色較基地孔深。經研究證真實溫育中的熱力學梯度也許是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導體,在試驗室的常規ELISA測定中,將板從室溫(通常在25℃擺布)置于37℃溫箱,板也升溫時,在外周孔與基地孔之間也許存在一熱力學梯度。因而運用水浴或在將反響溶液參加至板孔中時,將板和溶液均加熱至溫育溫度(如37℃),就可以很容易地掃除“邊緣效應",而且可進步測定的重復性。ELISA試劑盒還有就是在試驗中...
今天我給大家講講ELISA試劑盒常壓滅菌的操作關鍵:(1)進鍋不擠壓:擺放待滅菌的菌種袋必須分層,每層菌種袋不行擺太擠,要留一定空地,不能彼此擠壓。不適宜將菌種袋臥疊,要分層立放,以確保蒸汽暢流和接種穴無缺。為了防止棉塞易潮濕,可在棉塞上蓋一層薄膜或油紙,但掩蓋物不行太大,否則會影響上基層蒸汽暢流;也可將4個菌種袋的棉塞并攏,棉塞向下一同塞到4個菌種袋的空地中,這樣塑料袋標準要加長,但防潮作用杰出。(2)及時滅菌:隨裝隨滅。配料到滅菌間隔時間越短越好,防止雜菌自繁。大規模出產...
ELISA試劑盒的應按規則力求準確在ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應,即加標本和加酶結合物后。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育(incubation),有人稱之為孵育,在試劑盒中似不恰當。ELISA試劑盒屬固相免疫測定,抗原、抗體的結合只在固相表面上發生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結合的機會,只有z貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程,因此需經擴散才能達到反應的...
ELISA試劑盒即酶聯免疫吸附試驗,是一種常用的固相酶免疫測定方法。由于ELISA方法靈敏,特異性強不需要特殊設備,所以被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在臨床檢驗中除正常反應外,有時常可見到一些錯誤結果(即假陽性或假陰性);在此為大家解讀下ELISA試劑盒檢測受影響因素中標本的影響。溶血標本及混有紅細胞的血清采用ELISA法檢測易產生假陽性。可能是溶血血清中含有過氧化酶物質(紅細胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素),在洗滌...
ELISA試劑盒途徑的選擇決定于抗原的生物學特性和理化特性,如激素、酶、毒素等生物學活性抗原,通常不宜選用靜脈打針。不一樣個別對共同抗原的反應性不一樣,而且不一樣抗原發作免疫反應的能力也有強有弱,因此常常在打針抗原的一起,參與能增強抗原的抗原性物質,以影響機體發作較強的免疫反應,這種物質稱為免疫佐劑。免疫前取等容積*或不*佐劑與免疫原溶液混合,用振蕩器混勻成乳狀,也可以在免疫前取需求量佐劑置乳缽中研磨,均勻后再邊磨邊滴參與等容積抗原液(其中加卡介苗3~4mg/ml或不加),加...
ELISA試劑盒因此含雜質較多的抗原也可選用捕獲包被法,試驗的特異性、敏感性均由此得以改善,重復性亦佳。蛋白質與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附聯絡的,靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的效果于。可將聚苯乙烯板先經紫外線照射(例如30W紫外燈,75cm照射12小時),以增加其吸附功能。例如,在檢查抗DNA抗體時,需用DNA作為包被抗原,ELISA試劑盒而廣泛的固相載體一般不能直接與核酸聯絡。換言之,包被就是抗原或抗體聯絡到固相載體表面的進程。當抗原決定簇...